欧美韩国等使用艾普拜数字PCR法检测新冠病毒核酸

apexbio一步法三色RT-dPCR方法SARS-CoV-2（2019-nCoV）核酸检测试剂已在法国、美国、韩国用于新冠病毒核酸检测。

2019年12月以来的新冠病毒COVID-19爆发已被世界卫生组织宣布为国际关注的突发公共卫生事件。为了促进卫生当局的行动，开发可靠的实验室检测试剂至关重要。我司新冠病毒核酸检测试剂（数字PCR方法）针对SARS-CoV-2（2019-nCoV）正链RNA基因组ORF1ab和N基因的设计特异性引物探针，FAM（ORF1ab）和HEX（N）标记的探针。此外还包括作为PCR内部参考的CY5标记的人类管家基因，并于2020年2月满分上海临检中心的能力验证评审，用于国内多家疾控中心。

新冠病毒疫情国际形势严峻，apexbio新冠病毒核酸检测试剂（数字PCR方法）日前已发送法国、美国、韩国等抗击新冠病毒一线。

法国Stilla Technologies公司已在官网全球发布由我司苏州艾普拜生物开发的基于Naica^TM微滴芯片数字PCR平台的COVID-19三色新冠病毒核酸试剂（图1）的性能验证信息。

图1：艾普拜生物新冠病毒核酸检测试剂包含Naica^TM数字PCR检测所需全部试剂

性能特点

★ SARS-CoV-2检测试剂为即用型一步法三色RT-dPCR试剂，可在一次反应中定量两个SARS-CoV-2特定序列和一个内部参考基因。

★ 使用Naica平台进行的SARS-CoV-2特异性和灵敏度检测可观察到低至5个拷贝的ORF1ab基因和7个拷贝N基因。

★ 以人RNA为阴性对照，15个样本均未观察到假阳性。

图2：检测结果分析2D图、3D图、微滴分区图

图3：艾普拜生物新冠病毒核酸检测试剂灵敏度。竖线表示置信度为95%时平均值的置信区间。

空圆圈表示未检测到SARS-CoV-2。

以1ng人类RNA为背景，将含有SARS-CoV-2合成序列的阳性对照连续稀释七个点进行检测并重复三次。SARS-CoV-2的ORF1ab基因(FAM)从80个拷贝到5个拷贝，N基因(HEX)从120个拷贝到7个拷贝均能检测到。对样本进一步稀释，上述两种基因在每25µl反应中可检测到2个拷贝。（图3）同时以人RNA为阴性对照（15个孔）进行检测，结果显示无假阳性。

艾普拜生物公司致力于精准守护生命，通过>15家机构的样本检测结果反馈，针对于qPCR检测Ct>35的模糊样本，apexbio的数字PCR检测方案能做出明确阳性的判读。

【参考资料】

1.Chan JF, Yip CC, To KK, Tang TH, Wong SC, Leung KH, Fung AY, Ng AC, Zou Z, Tsoi HW, Choi GK, Tam AR, Cheng VC, Chan KH, Tsang OT, Yuen KY. Improved molecular diagnosis of COVID-19 by the novel, highly sensitive and specific COVID-19-RdRp/Hel real-time reverse transcription-polymerase chain reaction assay validated in vitro and with clinical specimens. J Clin Microbiol. 2020 Mar 4.

2.法国Stilla Tehcnologies公司官网：www.stillatechnologies.com

3.Stilla Technologies中国技术与示范中心-深蓝云生物科技官网：www.cycloudbio.com