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染色质免疫共沉淀

技术简介 样品要求 提供结果

染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是在体内研究DNA与蛋白质相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目的蛋白与特异DNA片段的结合情况,还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。它能真实、完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白,是目前确定与特定蛋白结合的基因组区域或确定与特定基因组区域结合的蛋白质的最好方法。基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。

ChIP-qPCR完美结合了ChIP技术和实时定量PCR技术。ChIP技术利用抗体特异性富集与特定转录因子/组蛋白修饰结合的DNA片段;qPCR技术使用SYBR荧光染料,非特异性的掺入DNA双链,发射荧光,保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步,最后利用Ct值进行定量分析。ChIP-qPCR能够专一,灵敏,快速,高重复地定量生物样品中特定转录因子/组蛋白修饰与已知基因启动子的结合。

服务编号 服务内容 周期
ABS50101-01 ≤4个样品 7个工作日
ABS50101-02 8≤样品≤4个 15个工作日
服务内容:

实验材料的交联;

交联材料总蛋白-染色质复合物的提取;

染色质复合物的裂解;

Protein-A的免疫共沉淀;

免疫结合复合体的洗脱;

微量DNA的抽提;

目的基因的检测(使用荧光定量PCR方法)或测序;

数据分析并整理报告。

ChIP-qPCR技术特点:

高特异性,针对感兴趣的基因启动子设计特异性的实时荧光定量PCR引物;

超宽的线性范围,可跨越7个数量级;

精确度高,重复性好;

灵敏度高。

技术路线: