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Western blot 检测

技术简介 样品要求 提供结果

免疫印迹法 (Western blot) 是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的实验技术。具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点,是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法,如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。

服务编号 样本数量 周期
ABS30101-01 ≤4张膜(9个样品/膜) 4-7个工作日
ABS30101-02 0张膜≥样品≥4张膜(9个样品/膜) 7-10个工作日
技术流程:

蛋白提取:针对不同材料不同种类蛋白设计适当的提取缓冲液,提取蛋白并测定蛋白浓度。也可采用客户自己提取的蛋白样品进行后续操作。

转膜:公司有PVDF膜、NC膜、低荧光背景PVDF膜可供选择,根据客户要求操作以满足不不同实验需要。

1.一抗稀释度的确定:

客户提供确定的一抗稀释度;

委托本公司通过预实验优化实验条件,摸索一抗稀释度,选择其中最佳的一个稀释度进行正式实验;

2.内参抗体的使用(由客户决定是否使用及使用的种类):

3、二抗种类选择(有三种二抗供客户选择):

AP(碱性磷酸酶)标记的二抗;

HRP(辣根过氧化物酶)标记的二抗;

红外(Dylight 680或Dylight 800)标记的二抗;

显色:可根据客户要求针对HRP、AP、Dylight等方法标记的二抗进行可见显色、化学发光、荧光及红外检测以满足不同的实验需求。

数据分析:根据客户要求进行数据分析,对于样品数量较多的实验还可以将多次实验数据整合起来进行数据分析。

建议提供目的蛋白阳性表达样品(纯蛋白或有阳性表达的细胞或组织)作为阳性对照;

每张膜可检测1-9个样品;

一抗需在正确条件下保存,避免污染及反复冻融;

如需进行数据分析,请另询价。