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数字PCR服务

服务简介

数字PCR技术是继一代普通PCR、二代荧光定量PCR之后的第三代PCR技术。

其原理是将含有核酸分子的反应体系制成成千上万个纳升级的微滴,其中每个微滴不含待检核酸靶分子,或者含有一个至数个待检核酸靶分子,且每个微滴都作为一个独立的PCR反应器,经PCR扩增后采用微滴阅读仪逐个对每个微滴进行检测。有荧光信号的微滴判读为 1;没有荧光信号的微滴判读为 0,因此该技术被称为数字PCR。最终根据泊松分布原理以及阳性微滴的比例,分析软件可计算给出待检靶分子的浓度或拷贝数。

数字PCR 是一个全新的绝对定量方式,与传统 PCR定量 PCR 相比:其结果的精确度、准确性和灵敏度更佳、定量的结果不再依赖于 Ct 值,直接给出靶序列的起始浓度,实现真正意义上的绝对定量。数字PCR在分子诊断领域将会发挥巨大的作用,数字 PCR 特别适合应用于拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究等,并对遗传病、癌症、产前诊的研究提供了一种全新的技术思路与手段,具有广泛的、不可替代的应用前景。


平台特点

全封闭无污染:样品加入特制芯片后全程封闭,无交叉污染;

微流控微滴制备:样品自动生成25,000~30,000个均匀微滴,随机平铺;

三通道检测:FAM/VIC/CY5 三色荧光检测,快速建立多次实验;

微滴回溯:精确到单个微滴图像;

兼容染料法和探针法及其他类似原理荧光方法。

服务内容

服务编号

服务内容

实验期限

ABS10101

样品DNA提取及模板制备

12个工作日

ABS10103

样品RNA提取及模板制备

23个工作日

ABS10301

RNA样品反转录

12个工作日

ABS20102

染料法引物设计合成

23个工作日

ABS20103

探针设计合成

Taqman

35个工作日

ABS20104

MGB

35个工作日

ABS20101

数字PCR检测反应

35个工作日

样品信息

血液样品:样品为EDTA抗凝或枸椽酸钠抗凝,样品量大于0.5 ml,样品采集后于-20°C或-80°C保存,干冰运输。

组织样品:样品可以为新鲜组织(最好-80°C保存)或石蜡包埋的组织,也可以是95%乙醇中固定的组织,组织量大于100 mg。组织样品用干冰运输。

DNA样品:纯度OD260/280 比值为 1.6-1.8,浓度≥10 ng/μl,体积≥20μl。

RNA样品:纯度OD260/280 比值为 1.8-2.0,浓度≥20 ng/μl,体积≥20μl。需要干冰运输。

交付报告

实验报告:包括实验方法、步骤、所用试剂、仪器型号及相关分析数据等。